ชุดตรวจหาแอนติเจน SARS-CoV-2 (ลาเท็กซ์อิมมูโนโครมาโตกราฟี)

ชุดตรวจหาแอนติเจน SARS-CoV-2 (ลาเท็กซ์อิมมูโนโครมาโตกราฟี)

คำแนะนำสำหรับการใช้งาน
ชุดตรวจหาแอนติเจน SARS-CoV-2 (ลาเท็กซ์อิมมูโนโครมาโตกราฟี) คืออิมมูโนแอสเซย์การไหลด้านข้างที่มีไว้สำหรับการตรวจหานิวคลีโอโปรตีนในเชิงคุณภาพของจากผ้าเช็ดปาก SARS-CoV-2 ในช่องคอหอย，sputum，bronchoalveolar，lavage fluid ใช้โดยผู้เชี่ยวชาญในการทดสอบและให้ผลการทดสอบเบื้องต้นเพื่อช่วยในการวินิจฉัยการติดเชื้อกับบุคคลที่สงสัยว่าเป็น COVID-19
การทดสอบนี้จัดทำขึ้นเพื่อใช้โดยห้องปฏิบัติการทางคลินิกหรือสำหรับบุคลากรทางการแพทย์สำหรับการทดสอบ ณ จุดให้บริการเท่านั้น ไม่ใช่สำหรับการทดสอบที่บ้าน
ผลลัพธ์จากการทดสอบแอนติเจนไม่ควรใช้เป็นพื้นฐานเพียงอย่างเดียวในการวินิจฉัยหรือแยกการติดเชื้อ SARS-CoV-2 หรือเพื่อแจ้งสถานะการติดเชื้อ การวินิจฉัยควรได้รับการยืนยันร่วมกับอาการทางคลินิกหรือวิธีการทดสอบทั่วไปอื่นๆ

สรุปและคำอธิบายของการทดสอบ
ไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่อยู่ในสกุล β โควิด-19 เป็นโรคติดเชื้อทางเดินหายใจเฉียบพลัน ผู้คนมักมีความอ่อนไหว ในปัจจุบัน ผู้ป่วยที่ติดเชื้อไวรัสโคโรน่าสายพันธุ์ใหม่เป็นสาเหตุหลักของการติดเชื้อ ผู้ติดเชื้อที่ไม่มีอาการก็สามารถเป็นแหล่งแพร่เชื้อได้เช่นกัน จากการตรวจสอบทางระบาดวิทยาในปัจจุบัน ระยะฟักตัวคือ 1 ถึง 14 วัน ส่วนใหญ่ 3 ถึง 7 วัน อาการหลัก ได้แก่ มีไข้ เหนื่อยล้า และไอแห้ง คัดจมูก น้ำมูกไหล เจ็บคอ ปวดกล้ามเนื้อ และท้องร่วงในบางกรณี
การตรวจหาแอนติเจนเป็นวิธีการทั่วไปในการวินิจฉัยการติดเชื้อไวรัสโคโรน่าสายพันธุ์ใหม่ การทดสอบนี้เป็นการทดสอบวินิจฉัยทางภูมิคุ้มกันที่ใช้สำหรับการตรวจหาแอนติเจนของนิวคลีโอโปรตีน SARS-CoV-2 โดยอาศัยการทดสอบ Latex-immunochromatography วิธีนี้รวดเร็วและสะดวกต่อการใช้งานและต้องใช้อุปกรณ์เพียงเล็กน้อย สามารถทำได้ภายใน 15-20 นาที โดยบุคลากรที่มีทักษะน้อยที่สุด

ทดสอบหลัก
ชุดนี้ใช้การทดสอบ Latex immunochromatography
การ์ดทดสอบประกอบด้วย:
1. หนูเมาส์นิวคลีโอโปรตีนโมโนโคลนัลแอนติบอดีและคอมเพล็กซ์แอนติบอดีควบคุมคุณภาพที่ติดฉลากด้วยไมโครสเฟียร์ลาเท็กซ์
2. เยื่อไนโตรเซลลูโลสตรึงด้วยเส้นทดสอบ (T line）และสายควบคุมคุณภาพหนึ่งเส้น (สาย C)
เมื่อเติมตัวอย่างในปริมาณที่เหมาะสมลงในหลุมตัวอย่างของการ์ดทดสอบ ตัวอย่างจะเคลื่อนไปข้างหน้าตามการ์ดทดสอบภายใต้การกระทำของเส้นเลือดฝอย
หากตัวอย่างมีแอนติเจนของ SARS-CoV-2 แอนติเจนจะจับกับไมโครสเฟียร์ลาเท็กซ์ที่มีป้ายกำกับว่าแอนติบอดี SARS-CoV-2 และคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกันจะถูกจับโดยโมโนโคลนัลแอนติ-ฮิวแมนแอนติบอดีที่ถูกตรึงบนเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสเพื่อสร้าง เส้นสีแดง แสดงว่าตัวอย่างมีค่าเป็นบวกสำหรับแอนติเจน

รีเอเจนต์ทดสอบ
สูตรเล็กน้อยสำหรับสื่อแต่ละชนิดมีดังนี้:

รีเอเจนต์และวัสดุที่จัดเตรียมให้
วัสดุที่มีให้:

หมายเหตุ: อุปกรณ์แบบใช้แล้วทิ้งหนึ่งชิ้นประกอบด้วยไม้กวาดหนึ่งอันและตัวอย่างเจือจาง 0.5 มล.
Specification：1T/กล่อง,20T/กล่อง,25T/กล่อง,50T/กล่อง,100T/กล่อง

วัสดุที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้
1.PPE เช่น ถุงมือ หน้ากาก เสื้อกาวน์ อุปกรณ์ป้องกันดวงตา
2. ถังขยะอันตรายทางชีวภาพ
3.ที่ใส่หลอด

คำเตือนและข้อควรระวัง
1. สำหรับกรณีฉุกเฉินและใช้งานโดยผู้เชี่ยวชาญด้านการแพทย์หรือสุขภาพเฉพาะในสถานพยาบาลที่กำหนดเท่านั้น
2. อ่านเอกสารกำกับบรรจุภัณฑ์ให้ครบถ้วนก่อนทำการทดสอบ การไม่ปฏิบัติตามคำแนะนำในการใส่แพ็คเกจอาจส่งผลให้ผลการทดสอบไม่ถูกต้อง
3. สวมชุดป้องกันที่เหมาะสมเมื่อจัดการและแปรรูปตัวอย่าง ล้างมือให้สะอาดหลังจากจับชิ้นงานทดสอบ
4. จัดการตัวอย่างราวกับว่ามีสารติดเชื้อตามขั้นตอนมาตรฐานและข้อควรระวังสากลของ CDC ของสหรัฐอเมริกา
5. ห้ามใช้หากท่อ/กระเป๋าชำรุดหรือแตกหัก
6. การทดสอบนี้ใช้เพียงครั้งเดียวเท่านั้น ห้ามนำกลับมาใช้ใหม่ในทุกกรณี
7. ความชื้นและอุณหภูมิอาจส่งผลเสียต่อผลลัพธ์
8. ปฏิบัติตามคำแนะนำการจัดเก็บที่ระบุไว้บนฉลากผลิตภัณฑ์ การจัดเก็บและการจัดการนอกเงื่อนไขเหล่านี้อาจส่งผลเสียต่อผลิตภัณฑ์
9. ห้ามใช้ผลิตภัณฑ์หลังจากวันหมดอายุที่ระบุ
10. กำจัดตัวอย่างทั้งหมดและส่วนประกอบทดสอบที่ใช้แล้วในภาชนะบรรจุของเสียที่เป็นอันตรายต่อสิ่งมีชีวิตที่ได้รับการรับรองและติดฉลากอย่างเหมาะสม

อายุการเก็บรักษาและการเก็บรักษา
1. บรรจุภัณฑ์เดิมควรเก็บไว้ในที่แห้งที่อุณหภูมิ 2-30°C และป้องกันไม่ให้ถูกแสง
2. อายุการเก็บรักษาของชุดทดสอบคือ 1 ปีนับจากวันที่ผลิต โปรดดูที่ฉลากผลิตภัณฑ์สำหรับวันหมดอายุที่ระบุ
3. หลังจากเปิดแพ็คเกจด้านในแล้ว การ์ดทดสอบจะใช้งานไม่ได้เนื่องจากการดูดซับความชื้น โปรดใช้ภายใน 1 ชั่วโมง
4. บรรจุภัณฑ์เดิมควรขนส่งที่อุณหภูมิ 2-37 ํC เป็นเวลา 20 วัน

การเก็บตัวอย่างและการจัดการ
การทดสอบนี้สามารถทำได้โดยใช้ humaninnasal swabs，pharyngeal swabs，sputum，bronchoalveolar，lavage，fluid เป็นต้น สามารถเก็บตัวอย่างได้โดยใช้ส่วนประกอบที่มาพร้อมกับการทดสอบและควรทดสอบทันที โปรดดูแผนภาพในส่วนขั้นตอนการทดสอบ

กระบวนการทดสอบ
1. เปิดกล่องบรรจุภัณฑ์ นำบรรจุภัณฑ์ด้านในออกมา แล้วปล่อยให้มันสมดุลกับอุณหภูมิห้อง
2. นำการ์ดทดสอบออกจากซองที่ปิดสนิทและใช้ภายใน 1 ชั่วโมงหลังจากเปิด
3. วางการ์ดทดสอบบนพื้นผิวที่สะอาดและได้ระดับ

ตัวอย่างจาก SARS-CoV-2 innasal swabs，pharyngeal swabs，sputum，bronchoalveolar，lavage fluid	หยดลงใน 500ul (ประมาณ 9-10 หยด) ตัวอย่าง Diluent จากขวดหยดไปที่หลอด วางตัวอย่างผู้ป่วยลงในหลอด ม้วนไม้กวาดอย่างน้อย 3 ครั้งในขณะที่กดหัวกับด้านล่างและด้านข้างของหลอด	â'¢ม้วนหัว Swab เข้ากับด้านในของ Tube เมื่อคุณถอดออก ทิ้ง Swab ที่ใช้แล้วลงในขยะอันตรายทางชีวภาพของคุณ
เติมขวดหยดพลาสติกแบบใช้แล้วทิ้งขนาดเล็กและใสที่มีตัวอย่างผู้ป่วยจากหลอดหรือปิดฝาขวดหยด	วางตัวอย่าง 60-100ul (2-3 หยด) ลงในการ์ดทดสอบ หมายเหตุ: ห้ามเทตัวอย่างจากหลอด	â'¥อ่านผลที่ 15 นาทีผลที่ถูกต้องภายใน 15-20 นาที ต้องมาซ้ำ

หรือ

ตัวอย่างจาก SARS-CoV-2 innasal swabs，pharyngeal swabs，sputum，bronchoalveolar，lavage，fluid	ทำลายแกนความปลอดภัยภายในและบีบของเหลวลงที่ด้านล่างของท่อ	â'¢บีบปลายไม้กวาดเพื่อเจือจางตัวอย่าง
â'£บิดฝาปิดท้ายดริปเปอร์	บีบตัวอย่างประมาณ 60-100ul (2-3drops) ตัวเจือจางลงบนการ์ดรีเอเจนต์	อ่านผลในเวลา 15 นาที ผลลัพธ์ถูกต้องภายใน 15-20 นาที ต้องมาซ้ำ

ควบคุมคุณภาพ
1. การ์ดทดสอบมีการควบคุมขั้นตอนภายใน การควบคุมนี้ยืนยันว่ามีการใช้ปริมาตรของตัวอย่างและเทคนิคที่เพียงพอ
2. ชุดนี้ไม่มีมาตรฐานการควบคุม
3. แนะนำให้ปฏิบัติตามแนวทางปฏิบัติที่ดีในห้องปฏิบัติการ รวมทั้งเพิ่มการควบคุมเชิงบวกและเชิงลบ เพื่อตรวจสอบประสิทธิภาพการทดสอบที่เหมาะสม

การตีความผลการทดสอบ
1. เชิงลบ:
หากปรากฏเฉพาะบรรทัดควบคุมคุณภาพ C และเส้นทดสอบ T ไม่ใช่สีแดง แสดงว่าไม่มีการตรวจพบแอนติเจน และผลลัพธ์เป็นลบ เนื่องจากข้อจำกัดของความไวในการตรวจจับ ผลลัพธ์เชิงลบอาจเกิดจากความเข้มข้นของแอนติเจนต่ำกว่าความไวในการวิเคราะห์ของผลิตภัณฑ์
2. บวก:
หากทั้งบรรทัดควบคุมคุณภาพ C และบรรทัดทดสอบ T ปรากฏขึ้น แสดงว่ามีการตรวจพบแอนติเจน ตัวอย่างที่มีผลบวกควรได้รับการยืนยันด้วยวิธีการทดสอบทางเลือกและผลการวิจัยทางคลินิกก่อนทำการวินิจฉัย
3. ไม่ถูกต้อง:
หากบรรทัดควบคุมคุณภาพ C ไม่ปรากฏขึ้น แสดงว่าผลการทดสอบไม่ถูกต้องไม่ว่าจะมีเส้นทดสอบสีแดงหรือไม่ และควรทำการทดสอบอีกครั้ง
ทำการทดสอบซ้ำโดยใช้ตัวอย่างที่เหลือหรือตัวอย่างใหม่ หากผลลัพธ์ไม่ชัดเจน
หากการทดสอบซ้ำไม่ได้ผลลัพธ์ ให้หยุดใช้ชุดอุปกรณ์และติดต่อผู้ผลิต

ลักษณะการทำงาน
ปฏิกิริยาข้าม
ชุดตรวจหาแอนติเจน SARS-CoV-2 (ลาเท็กซ์อิมมูโนโครมาโตกราฟี) ได้รับการทดสอบสำหรับแอนติเจน Influenza A H1N1, แอนติเจน Influenza A H3N2, แอนติเจน Influenza B, แอนติเจน Adenovirus, แอนติเจน Mycoplasma , แอนติเจน Syncytial ทางเดินหายใจ, ตัวอย่าง Staphylococcus aureus antigen，Streumptoc ผลลัพธ์ไม่แสดงปฏิกิริยาข้าม
การรบกวน
เพิ่มความเข้มข้นของเชื้อโรคลงในตัวอย่างที่เป็นลบทางคลินิก และผลการทดสอบไม่ควรมีปฏิกิริยาการรบกวน เชื้อโรคที่เพิ่มเข้ามาจะแสดงในตารางต่อไปนี้:

ข้อจำกัดของการทดสอบ
1. ผลิตภัณฑ์นี้ใช้สำหรับการประเมินเชิงคุณภาพของแอนติเจน SARS-CoV-2 เท่านั้น
2. การทดสอบนี้จัดทำขึ้นเพื่อใช้โดยห้องปฏิบัติการทางคลินิกหรือสำหรับบุคลากรทางการแพทย์สำหรับการทดสอบ ณ จุดดูแลเท่านั้น ไม่ใช่สำหรับการทดสอบที่บ้าน
3. ผลลัพธ์จากการทดสอบแอนติเจนไม่ควรใช้เป็นพื้นฐานเพียงอย่างเดียวในการวินิจฉัยหรือแยกการติดเชื้อ SARS-CoV-2 หรือเพื่อแจ้งสถานะการติดเชื้อ การวินิจฉัยควรได้รับการยืนยันร่วมกับอาการทางคลินิกหรือวิธีการทดสอบทั่วไปอื่นๆ
4. ผลลัพธ์เชิงลบไม่ได้แยกแยะการติดเชื้อ SARS-CoV-2 โดยเฉพาะในผู้ที่สัมผัสกับไวรัส การตรวจติดตามผลด้วยการวินิจฉัยระดับโมเลกุลควรพิจารณาเพื่อขจัดการติดเชื้อในบุคคลเหล่านี้
5. ผลลบหรือไม่เกิดปฏิกิริยาอาจเกิดขึ้นได้หากปริมาณของแอนติเจนสำหรับไวรัส SARS-CoV-2 ที่มีอยู่ในตัวอย่างต่ำกว่าขีดจำกัดการตรวจจับของการทดสอบ
6. การทดสอบนี้สามารถตรวจพบ SARS-CoV และ SARS-CoV-2 ไม่ว่าไวรัสจะมีชีวิตอยู่ (มีชีวิตอยู่) หรือไม่มีชีวิต ประสิทธิภาพการทดสอบขึ้นอยู่กับปริมาณของไวรัส (แอนติเจน) ในตัวอย่าง ，แต่ไม่จำเป็นต้องสัมพันธ์กับระดับแอนติเจน SARS-CoV-2 ในตัวอย่าง
7. ผลการทดสอบเชิงลบอาจเกิดขึ้นได้หากระดับของแอนติเจนต่ำกว่าขีดจำกัดการตรวจจับ หรือหากตัวอย่างถูกรวบรวมหรือขนส่งอย่างไม่เหมาะสม
8.Failure to follow the กระบวนการทดสอบ may adversely affect test performance and/or invalidate the test result.

อ้างอิง
1. Chaolin Huang, Yeming Wang และคณะ ลักษณะทางคลินิกของผู้ป่วยที่ติดเชื้อไวรัสโคโรน่าสายพันธุ์ใหม่ 2019 ในเมืองอู่ฮั่น ประเทศจีน มีดหมอ.2020;VOL395:497-506.
2. Zhu N, Zhang D, Wang W, Li X, Yang B, Song J, และคณะ นวนิยาย Coronavirus จากผู้ป่วยโรคปอดบวมในประเทศจีน 2019 24 มกราคม 2020 วารสารการแพทย์นิวอิงแลนด์
3. ลามาร์ เอ, ทัลบอต พีเจ ผลของ pH และอุณหภูมิต่อการติดเชื้อในมนุษย์ coronavirus 229E วารสารจุลชีววิทยาของแคนาดา. 1989;35(10):972-4.
4. วัง C, Horby PW, Hayden FG, Gao GF การระบาดของโรค coronavirus ใหม่ของความกังวลด้านสุขภาพทั่วโลก มีดหมอ. 24 มกราคม 2563